柱前衍生RP唱HPLC法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸
投稿时间:2016-10-13  修订日期:2016-12-16  点此下载全文
引用本文:陈哲,路娟,彭纪铭,柴瑞平,陈曦.柱前衍生RP唱HPLC法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸[J].药学实践杂志,2017,35(2):130~133
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作者单位E-mail
陈哲 中国医学科学院药用植物研究所, 北京 100193  
路娟 中国医学科学院药用植物研究所, 北京 100193  
彭纪铭 中国医学科学院药用植物研究所, 北京 100193
山东中医药大学, 山东 济南 250355 
 
柴瑞平 中国医学科学院药用植物研究所, 北京 100193  
陈曦 中国医学科学院药用植物研究所, 北京 100193 chenxi@implad.ac.cn 
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81673667);国家重大科技专项(2014ZX09201022-006)
中文摘要:目的 建立柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸含量的方法。方法 采用Waters XBridge Shield RP18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,梯度洗脱,流速0.8 ml/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果 14种氨基酸在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r值均>0.9990,加样回收率(n=6)为90.2%~105.1%,氨基酸衍生溶液在24 h内稳定。结论 本实验建立的方法可靠,可用于珐菲亚中氨基酸的含量测定。
中文关键词:珐菲亚  柱前衍生  反相高效液相色谱法  氨基酸  异硫氰酸苯酯
 
Simultaneous determination of 14 amino acids in Pfaffia by RP-HPLC with precolumn derivatization
Abstract:Objective To develop a HPLC method for determining 14 hydrolyzed amino acids in Pfaffia.Methods The sample was derivatized with phenyl isothiocyanate (PITC). Amino acids were separated on Waters XBridge Shield RP18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm) column at the flow rate of 0.8 ml/min, detected at 254 nm. The column temperature was 25℃.Results The response was linear for 14 amino acids with a correlation coefficient r>0.999 0. The average recoveries (n=6) were 90.2%-105.1%. Amino acids derivative solution remained stable in 24 hours.Conclusion This well-established method is very reliable. It can be used as a quantitative determination method for 14 amino acids in Pfaffia.
keywords:Pfaffia  pre-column derivatization  RP-HPLC  amino acids  phenyl isothiocyanate
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